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qPCR (PCR quantitative) :  de la théorie à la réalisation pratique

qPCR (PCR quantitative) : de la théorie à la réalisation pratique

Qualiopi
En centre
Non éligible CPF
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Objectifs
Programme

La formation est axée sur l’application de la technologie de la

PCR en temps réel (Real-Time PCR), avec un accent particulier

sur la pratique.

– Comprendre et appliquer les diverses techniques de

quantification des acides nucléiques ARN et ADN

– Acquérir les connaissances théoriques et pratiques permettant de

choisir la stratégie de PCR quantitative la mieux adaptée

aux contraintes expérimentales

– Avoir une vue d’ensemble des logiciels couramment utilisés

pour l’analyse des résultats.

Présentation des différents principes de la PCR quantitative

– Rappels sur les fondamentaux de la PCR quantitative, notion de

Cq, formats de fluorescence, méthodes de calcul de l’efficacité

– Mise au point d’une PCR quantitative : optimisation, validation,

plan d’expérience, stratégies de normalisation, dilutions etc.

– Calibration et droite d’étalonnage

Stratégies en PCR quantitative

– Méthode par quantification absolue (standard externe)

– Méthode par quantification relative avec et sans standard externe

– Normes MIQE

TRAVAUX DIRIGÉS

– Design et conception des amorces, choix des amorces, résolution

des problèmes de spécificité et de sensibilité

– Principes de la PCR relative, choix des gènes de normalisation

avec différents logiciels, suivi de la normalisation par la méthode

Δ Δ Ct

Public visé

Ingénieurs, techniciens.

Prérequis

Maîtriser les techniques de base de la biologie moléculaire

Méthodes pédagogiques

Enseignements : 40 %

Travaux pratiques : 60 %

Modalités d'évaluation

QCM, TD et TP.

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Réalisation :Definima
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