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Electrophorèses et western blot : théorie et applications
Objectifs
Programme
Comprendre les principes de migration éléctrophorétique, de transfert et de révélation des protéines. Maitriser les différents paramètres. Mettre en œuvre des éléctrophorèses et western blot.
NOTIONS THÉORIQUES
– Influence des paramètres physicochimiques (température, pH,
charge, force ionique, agents dénaturants, ...) sur la structure
– et les propriétés des protéines
– Electrophorèses : principe, les différents types, les paramètres
de migration
– Conditions natives, dénaturantes et réductrices
– Les transferts : principe, les différents types, les paramètres de
transfert et les différents supports
– Techniques de révélation des protéines sur gel d’électrophorèse
(analyse comparative et limite de détection)
– Techniques de révélation sur les membranes de western blot
(analyse comparative et limite de détection)
– Les différentes étapes de validation expérimentale
ATELIERS PRATIQUES
– SDS-PAGE (de la préparation des gels à la révélation
colorimétrique)
– Western Blot (transfert, coloration au rouge Ponceau et
immunodétection)
Public visé
Ingénieurs, techniciens, doctorants, chercheurs souhaitant comprendre, approfondir et acquérir les techniques d’électrophorèses et de western blot.
Prérequis
aucun
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